恒遠生物|人羊膜細胞(WISH)培養(yǎng)建議

品牌: 恒遠生物

貨號: HYCC10347

中文名稱: 人羊膜細胞；WISH

規(guī)格: T25

形態(tài)特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 最初以為這株細胞的起源是正常羊膜，但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋法分析，證實該細胞是HeLa細胞污染的；角蛋白陽性。

培養(yǎng)條件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS　

傳代方法: 1：2~1:4傳代，每周2~3次。

凍存條件: 無血清細胞凍存液




一、細胞培養(yǎng)常見問題解答




1.培養(yǎng)基為什么一般都是偏紅色?

因為培養(yǎng)基加了酚紅來顯示顏色，指示pH范圍為6-8，顏色會由黃變?yōu)樽霞t。這是為了我們能更直觀觀察培養(yǎng)液的變化，如變黃，則代表偏酸，偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說，細胞吸收營養(yǎng)后，變黃后就暗示我們要換培養(yǎng)基啦!所以密切觀察很重要哦!




2.細胞的居住環(huán)境

舒適無菌的環(huán)境是細胞健康生活的重要基礎(chǔ)。如下圖為培養(yǎng)細胞的器皿，包括形狀、規(guī)格、用途多樣的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿及培養(yǎng)板。最終住進37℃，5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱。




3.細胞培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶區(qū)別?

就細胞培養(yǎng)狀態(tài)來說，培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿沒有太大區(qū)別，主要在于安全系數(shù)(培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)、培養(yǎng)細胞數(shù)量(大培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)。但是培養(yǎng)瓶成本也會相對較高，因此無特殊要求，一般選擇培養(yǎng)皿即可。




4.為什么細胞復蘇后，很多難以貼壁?

忽略培養(yǎng)基的問題，主要考慮細胞凍存時狀態(tài)差或者復蘇時動作太慢導致細胞死亡。切記最重要的融化速度要快，可不時搖動冷凍管，使之盡快通過最易受損的溫度段(-5～0℃)。




5.細胞凍存時對細胞量有要求嗎?

細胞復蘇時會有一定的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，起始濃度106—107個/ml/管。




6.細胞污染怎么辦?

如發(fā)現(xiàn)細胞有污染，一般建議丟棄。如果細胞非常寶貴，可試著加入含抗生素的培養(yǎng)基反復清洗，并用抗生素含量高的培養(yǎng)基培養(yǎng)，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。




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