胎牛血清培養(yǎng)如何防止黑點生成

近期有客戶向我們咨詢胎牛血清細胞培養(yǎng)中黑點如何防止生成？對此我司技術(shù)專員給出了詳細了解釋，為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。因此定要做好以下幾點。方可使細胞培養(yǎng)順利。



1.盡可能地減少血清凍融次數(shù)。


2.培養(yǎng)基無需37℃水浴。


3.培養(yǎng)基保持zuiPH 值7.0-7.2。


4.嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。


5.掌握細胞傳代的zui時機，細胞切勿生長過老。


 一、化凍 
將血清從-20 度冰箱中取出，室溫（或浸于自來水中）化凍（約需要30分鐘至2小時，也可放于4度冰箱化凍過夜；化凍后若不馬上滅活，可以放入4度冰箱中暫時保存）


二、滅活
1.放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱（同時放入一個空的血清瓶，內(nèi)裝100ml自來水，插入一根溫度計，溫度監(jiān)控以此為準）
2.當溫度計顯示56度時，停止加熱，改為間斷加熱，維持56度（±0.5度）30分鐘（±3分鐘；若不小心使溫度上升超過56度，則：若仍未超過60度，且時間很短，比如不超過5分鐘，則仍可使用；若超過60度，或者時間較長，則棄去不用，或者嘗試用于一些普通細胞的培養(yǎng)）
3.取出，自然冷卻至室溫（約需1-3小時），可分裝或-20度繼續(xù)凍存。


三、分裝
1.轉(zhuǎn)入無菌間，在超凈臺內(nèi)將血清分裝入10ml離心管中（注意預先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻；用吸液管或吹大管吹出血清時要注意：不要吹出氣泡（血清很粘稠，很容易產(chǎn)生氣泡；如果產(chǎn)生氣泡， 則在酒精燈火焰上過一下）。
2.放入-20 度冰箱凍存。
3.全部操作約需要4-6小時。


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