血清出現(xiàn)沉淀有什么影響嗎?

很多小伙伴買到血清的時(shí)候會出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,什么是沉淀呢？沉淀會影響使用嗎？沉淀和血清質(zhì)量有關(guān)嗎？該如何處理沉淀呢？接下來和小編一探究竟吧！

1.什么是血清沉淀？
血清中經(jīng)常會出現(xiàn)肉眼可見的沉淀，其成分有多種類型，產(chǎn)生的原因有很多，主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。




① 纖維蛋白（Fibrin）
血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產(chǎn)過程中，血清采集、過濾（3 次 0.1 μm過濾）和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時(shí)血清中纖維蛋白原（Fibrinogen）處于溶解狀態(tài)。但在解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝集，形成肉眼可見的沉淀。
② 磷酸鈣（Calcium Phosphate）
這是一種常見的沉淀成分，通常會造成血清出現(xiàn)云霧狀渾濁。當(dāng)產(chǎn)品在 37℃保存時(shí)，這種現(xiàn)象尤其明顯，在倒置顯微鏡下可觀察到小黑點(diǎn)的存在。這些小黑點(diǎn)在布朗運(yùn)動的作用下四處游動，常被誤認(rèn)為是微生物污染。
③ 其他成分（Other）血清中的其他成分也會形成沉淀，例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等




2.血清沉淀會影響細(xì)胞培養(yǎng)嗎？

① 細(xì)胞生長
我們在出廠前都會對血清進(jìn)行一系列質(zhì)檢測試，確保血清質(zhì)量達(dá)到嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)。血清測試和細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)也表明，其沉淀成分不會影響血清作為細(xì)胞培養(yǎng)添加物的表現(xiàn)。這一點(diǎn)得到了眾多客戶和其他血清供應(yīng)商的肯定。解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝集，形成肉眼可見的沉淀。




② 懷疑污染
磷酸鈣顆粒經(jīng)常會被當(dāng)成微生物污染而引發(fā)不必要的擔(dān)憂。一般情況下，當(dāng)操作人員融化血清后注意到有霧狀渾濁時(shí)，常將其存放在 4℃冰箱中觀察，并考慮接下來是否繼續(xù)使用。但這樣會使沉淀進(jìn)一步增多，反而會使血清更加渾濁，進(jìn)而誤以為存在血清污染。并且，在倒置顯微鏡下，可在血清中觀察到四處游動的小黑點(diǎn)（磷酸鈣顆粒的布朗運(yùn)動），更容易使人誤以為存在微生物污染。
為防止這類誤解的產(chǎn)生，我們不建議客戶培養(yǎng)血清來驗(yàn)證是否存在污染，而是將血清直接接種在細(xì)菌培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，以觀察是否有細(xì)菌的增殖。并且，進(jìn)行革蘭氏染色，并在油鏡（100 X 10 倍）下觀察可直接確認(rèn)是否存在微生物污染。







3.怎樣操作可以盡量避免沉淀出現(xiàn)？
① 解凍血清時(shí)，請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。




② 解凍血清時(shí)，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

③ 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

④ 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

⑤ 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。
4.出現(xiàn)血清沉淀該如何處理？
我們建議您采用2000 rpm 離心5分鐘，取上清使用就好，比過濾方便，不需要另外準(zhǔn)備濾心和針筒，又不容易污染。
5.總 結(jié)：

血清產(chǎn)品中出現(xiàn)沉淀屬于常見現(xiàn)象，但不會影響血清的品質(zhì)，對細(xì)胞培養(yǎng)而言也是沒有任何問題的，大家可以放心使用！

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