zui近在做ELISA實驗，購買的是RD公司的ELISA試劑盒，*按照上面的說明書步驟去做，發(fā)現(xiàn)做出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線還是可以的，但是樣本OD值很低，就是顯色很淡，不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍之內(nèi)，而試劑盒zui低靈敏度是100PG/ML。所以我訂的標(biāo)準(zhǔn)曲線zui高濃度是4000PG/ML，我的樣本是人血清，而購買的試劑盒說明書說應(yīng)用于細(xì)胞血清的測定，用在人血清測定需要改變一些條件，但是本人摸索了一個多月，還是沒能做出來。我不知道問題出在哪里，zui近試著把標(biāo)準(zhǔn)品放在人血清里檢測，得到的OD值也是很低0.1左右，也不再曲線范圍。為什么會這樣呢？我用的是1%BSA+PBS作為稀釋劑，后面該用10%胎牛血清也是不行。所以問問給位同仁，我的問題出現(xiàn)在哪里啊，人家做ELISA，很快就完成了，可我怎么那么做不出來呢？
王同學(xué)可根據(jù)我司給出的建議：
1. 試劑盒沒有質(zhì)量問題，應(yīng)該從樣品及保存上找原因。
2.你可以試試EDTA抗凝后取血漿檢測。
3. 新鮮樣品檢測一下，將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋后加入血清或血漿中檢測（也就是用血清進(jìn)一步稀釋標(biāo)準(zhǔn)品），觀察檢測結(jié)果，判斷是否是血淸中有未知物質(zhì)影響。
4. 適當(dāng)延長顯色時間。
5. 更換酶標(biāo)儀，排除儀器原因。
6. 咨詢RD的，幫助找原因。
7. 更換廠家試劑盒，重新做。
上海恒遠(yuǎn)生物專業(yè)代理Elisa試劑盒，含稅含運費，*進(jìn)口試劑盒，RD試劑盒，我司全面提供免費代測服務(wù)，用于試劑盒生產(chǎn)的抗體全部美國進(jìn)口。
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