做ELISA實驗時,大家都知道樣本要進行一定比例的濃度稀釋,且稀釋太低或太高都會導(dǎo)致線性關(guān)系不理想,結(jié)果也就不準了。那么,如何從標(biāo)準曲線中通過樣本的吸光度計算樣本中的蛋白含量?方法很簡單,只需三步驟,輕輕松松搞定。
1. 設(shè)立標(biāo)準品,以不同濃度標(biāo)準品的吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)建立坐標(biāo)系,求出曲線方程y=ax+b,
2. 得出回歸方程 x=(y-b)/a
3. 所得樣品吸光度代入方程即可取得所檢測的濃度
Elisa檢測中,包被酶標(biāo)版所用的抗體量,可以用公式計算:V=5n/a(單位:ul),a:抗體濃度,n:酶標(biāo)板數(shù)量。